رنگ‌آمیزی گرم

رنگ‌آمیزی گرم یکی از مهمترین ومتداولترین روش‌های رنگ آمیزی در باکتری‌شناسی است که اولین بار توسط کریستین گرم ابداع شد. دراین رنگ آمیزی باکتری‌ها بر مبنای رنگ باکتری پس ازرنگ آمیزی به دودسته گرم مثبت و گرم منفی تقسیم می‌شوند. رنگ باکتری پس ازرنگ آمیزی به توانایی حفظ رنگ اول وبه عبارتی به ساختمان دیواره سلولی باکتری بستگی دارد. دررنگ آمیزی گرم باکتری‌های گرم مثبت پس ازرنگ آمیزی به رنگ بنفش وباکتری‌های گرم منفی به رنگ قرمز مشاهده می‌شود.

گرچه هر دو گروه یعنی باکتری‌های گرم مثبت و منفی دارای دیواره می‌باشند ولی فرق بین این دو گروه مربوط به خواصی است که در ساختمان دیواره سلولی آنها وجود دارد. اساس ساختمان در دیواره سلولی باکتری‌های گرم مثبت یک لایه ضخیمی‌است از پپتیدوگلیکان، ولی در باکتری‌های گرم منفی ضخامت آن به حداقل می‌رسد.

To conduct a proper negative stain the following procedure should be followed:

1. Place a very small drop (more than a loop full--less than a free falling drop from the dropper) of nigrosin near one end of a well-cleaned and flamed slide.

2. Remove a small amount of the culture from the slant with an inoculating loop and disperse it in the drop of stain without spreading the drop.

3. Use another clean slide to spread the drop of stain containing the organism using the following technique.
 

4. Rest one end of the clean slide on the center of the slide with the stain.  Tilt the clean slide toward the drop forming an acute angle and draw that slide toward the   drop until it touches the drop and causes it to spread along the edge of the spreader slide.  Maintaining a small acute angle between the slides, push the spreader slide toward the clean end of the slide being stained dragging the drop behind the spreader slide and producing a broad, even, thin smear.